DNase I, RNase-Free, HC

货号/规格：E1018-A/1,000 U

浓度：50 U/µL

产品简介

DNase I（无 RNase）是一种可酶切单链和双链 DNA 的核酸内切酶。它水解磷酸二酯键，产生带有 5'-磷酸基团和 3'-OH 基团的单脱氧核糖核苷酸和寡脱氧核糖核苷酸。

该酶的活性严格依赖于 Ca²⁺，由 Mg²⁺ 或 Mn²⁺ 离子活化。

在 Mg²⁺ 存在时，DNase I 以统计意义上随机的方式独立切割 dsDNA 各链。Mn²⁺ 存在时，该酶几乎在同一位点切割两条 DNA 链，产生带有平末端或仅一或两个核甘酸的突出端的 DNA 片段。

产品组成

储存条件

保存于-20°C。

来源

重组 E. coli 菌株，含有编码牛 DNase I 的克隆基因。

单位定义

一个单位是指在37°C下1分钟内完全降解 1 µg质粒 DNA所需的酶量。

在以下混合物中测定酶活性：

10 mM Tris-HCl（25°C 时 pH 7.5）、2.5 mM MgCl ₂、0.1 mM CaCl ₂、1 µg pUC19 DNA。一个 DNase I 单位相当于 0.3 Kunitz 单位。

特点

• 重组酶

• 从非动物宿主纯化而来，内源性 RNase 水平较低

适用范围

• 制备不含 DNA 的 RNA

• 体外转录后去除模板 DNA

• 在进行 RT-PCR 和 RT-qPCR 之前制备无 DNA 的 RNA

• 与 DNA 聚合酶 I 配合，通过缺口平移进行 DNA 标记

• 采用 DNase I（无 RNase）足迹法进行 DNA-蛋白相互作用研究

• 生成随机重叠 DNA 插入片段文库。使用含有 Mn²⁺ 的反应缓冲液